علوم دامی ایران

علوم دامی ایران

تأثیر افزودن سرما محافظ‌های نفوذی گلیسرول، دی متیل استامید و دی متیل فرمامید و غیر نفوذی تره‌هالوز و ساکارز بر انجماد‌پذیری اسپرم اسب

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان
1 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه علوم دامی، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران، کرج
2 دامپزشکی علوم دامی
3 دانشیار، مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی
4 استادیار، گروه علوم دامی، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران، کرج
چکیده
این پژوهش به‌منظور مقایسۀ تأثیر افزودن سطوح مختلف سه نوع سرما­محافظ نفوذی (گلیسرول، دی متیل استامید، دی متیل فرمامید) و دو نوع سرما­محافظ غیرنفوذی (تره­هالوزو ساکارز) به رقیق‌کنندۀ اسپرم اسب­های ترکمن انجام شد. برای این منظور چهار سر نریان بالغ ترکمن برای اسپرم­گیری به کار گرفته شد. پس از گرفتن مایع منی و فرآوری آن به‌منظور جداسازی ژل و پلاسمای منی در آزمایشگاه، نمونه­های منی به گروه­های تیماری شامل سطوح 5 و 7 درصد سرمامحافظ­های نفوذی  گلیسرول، دی متیل استامید (DMA) و دی متیل فرمامید (DMF) و سطوح 50 و 100 میلی مول سرمامحافظ­های غیرنفوذی تره­هالوز و ساکارز حل‌شده در رقیق­کننده تقسیم و با یک روش استاندارد، منجمد شدند. پس از یخ­گشایی، فراسنجه­های جنبایی و زنده­‌مانی برای همۀ تیمارها ارزیابی شد. نتایج این پژوهش نشان داد، زنده­مانی اسپرم­های منجمدشده با رقیق­کنندۀ حاوی 5 یا 7 درصد DMF (به­ترتیب 93/0±6/68 و 22/2±2/63 درصد) و سطوح 5 یا 7 درصد DMA (به ترتیب 69/1±6/68 و 76/2±6/63 درصد) از اسپرم­های منجمدشده با رقیق­کنندۀ حاوی سطوح 5 یا 7 درصد گلیسرول (به ترتیب 06/3±8/56 و 03/1±6/55 درصد) به‌طور معنی­داری بهتر بود (05/0P<). جنبایی کل اسپرم‌های­ تیمارشده با سطح 5 درصد DMA (02/1±4/68 درصد) نسبت به سطح 7 درصد DMF (46/1±8/61 درصد) به‌طور معنی­داری افزایش نشان داد (05/0P<). همچنین زنده­مانی و جنبایی اسپرم­ها تحت تأثیر نوع سرما محافظ­های غیر نفوذی قرار نگرفته و این سرما محافظ­ها تفاوت معنی­داری نسبت به هم نشان ندادند (05/0P>). بر پایۀ این نتایج می­توان گفت که سرما‌محافظ‌هایی مانند DMA و DMF می­توانند جایگزین مناسبی برای گلیسرول باشند.
کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله English

The effect of addition of different levels of permeable and non-permeable cryoprotectants on freezing capacity of stallions sperm

نویسندگان English

Farhad Vafayi 1
ahmad zareh 2
Hamid Kohram 3
Afshin Seifi-jamadi 4
1 M.Sc. Student, University College of Agriculture & Natural Resources, University of Tehran, Karaj, Iran
3 Associate Professor, Facility members of Razi Vaccine and Serum Research Institute, Karaj, Iran
4 ssistant Professor, University College of Agriculture & Natural Resources, University of Tehran, Karaj, Iran
چکیده English

The aim of this study was to evaluate the effect of addition of three different permeable (Glycerol, Dimethyl formamide and Dimethyl acetamid) and two different non-permeable cryoprotectant (Trehalose and sucrose) to the extender on freezing capacity of Turkmen stallions’ sperm. Four healthy mature Turkmen stallions (8-10 years old) were used. Collected semen from stallions were processed and pooled after gel removal and before allocating to treatments [glycerol, dimethyl formamide and dimethyl acetamid (5 or 7 percent) and trehalose or sucrose (50 and 100 mM)]. The prepared treatments were frozen according to a standard method. After thawing viability and motility of all treatments were accessed.The results showed that the viability and motility of spermatozoa treated with extender containing 5 or 7 % dimethyl formamide (68.6 ± 0.93 and 63.2 ± 2.22 respectively) or dimethyl acetamid (68.6 ± 1.69 and 63.6 ± 2.76 respectively) were significantly higher than those which treated with 5 or 7 %  glycerol (56.8 ± 3.06 and 55.6 ± 1.03 respectively) (P<0.05). Also, results showed that the viability and motility of stallion spermatozoa were not influenced by the non-permeable cryoprotectants (P<0.05).We concluded that dimethyl acetamid and dimethyl formamide can be proper alternatives for glycerol as a common stallion spermatozoa cryoprotectant and the sucrose and trehalose had no significant effect on the stallion sperm quality after freeze-thawing process.

کلیدواژه‌ها English

CASA
cryoprotectant
extender
Sperm
stallion
  1. Álvarez, C., Gil, L., González, N., Olaciregui, M. & Luño, V. (2014). Equine sperm post-thaw evaluation after the addition of different cryoprotectants added to INRA 96 extender. Cryobiology, 6, 144-148.
  2. El-Sheshtawy, R. I., Sisy, G. A. & El-Nattat, W. S. (2015). Effects of different concentrations of sucrose or trehalose on the post-thawing quality of cattle bull semen. Asian Pacific Journal of Reproduction, 4, 26-31.
  3. Evans, G. & Maxwell, W. C. (1987). Salamons' artificial insemination of sheep and goats. Butterworths.
  4. Fayrer-Hosken, R., Abreu-Barbosa, C., Heusner, G. & Jones, L. (2008). Cryopreservation of stallion spermatozoa with INRA96 and glycerol. Journal of Equine Veterinary Science, 28, 672-676.
  5. Fernández-Santos, M. R., Esteso, M. C., Montoro, V., Soler, A. J. & Garde, J. J. (2006). Cryopreservation of Iberian red deer (Cervus elaphus hispanicus) epididymal spermatozoa: effects of egg yolk, glycerol and cooling rate. Theriogenology, 66, 1931-1942.
  6. Glazar, A. I., Mullen, S. F., Liu, J., Benson, J. D., Critser, J. K., Squires, E. L. & Graham, J. K. (2009). Osmotic tolerance limits and membrane permeability characteristics of stallion spermatozoa treated with cholesterol. Cryobiology, 59, 201-206.
  7. Guay, P., Rondeau, M. & Bucher, S. (1981). Effect of glycerol on motility, viability, extracellular aspartate aminotransferase release and fertility of stallion semen before and after freezing. Equine Veterinary Journal, 13, 177-182.
  8. Hammerstedt, R. H., Graham, J. K. & Nolan, J. P. (1990). Cryopreservation of mammalian sperm: what we ask them to survive. Journal of Andrology, 11, 73-88.
  9. Malo, C., Gil, L., Gonzalez, N., Martínez, F., Cano, R., De Blas, I. & Espinosa, E. (2010). Anti-oxidant supplementation improves boar sperm characteristics and fertility after cryopreservation: comparison between cysteine and rosemary (Rosmarinus officinalis). Cryobiology, 61(1) 142-147.
  10. Metcalf, E. S., Dideon, B. A., Blehr, R., Schlimgen, T., Bertrand, W., Varner, D. D. & Hausman, M. S. (2008). Effects of DMSO and L-Ergothioneine on post-thaw semen parameters in stallions: Preliminary results. Animal Reproduction Science, 107, 332-333.
  11. Morris, G. J., Faszer, K., Green, J. E., Draper, D., Grout, B. W. W. & Fonseca, F. (2007). Rapidly cooled horse spermatozoa: loss of viability is due to osmotic imbalance during thawing, not intracellular ice formation. Theriogenology, 68, 804-812.
  12. Peña, F. J., García, B. M., Samper, J. C., Aparicio, I. M., Tapia, J. A. & Ferrusola, C. O. (2011). Dissecting the molecular damage to stallion spermatozoa: The way to improve current cryopreservation protocols? Theriogenology, 76, 1177-1186.
  13. Purdy, P. H. (2006). A review on goat sperm cryopreservation. Small Ruminant Research, 63, 215-225.
  14. Salamon, S. & Maxwell, W. M. C. (2000). Storage of ram semen. Animal Reproduction Science, 62, 77-111.
  15. Seifi-Jamadi, A., Ahmad, E., Ansari, M. & Kohram, H. (2017). Antioxidant effect of quercetin in an extender containing DMA or glycerol on freezing capacity of goat semen. Cryobiology, 75, 15-20.
  16. Seifi-Jamadi, A., Kohram, H., Shahneh, A. Z., Ansari, M. & Macías-García, B. (2016). Quercetin Ameliorate Motility in Frozen-Thawed Turkmen Stallions Sperm. Journal of Equine Veterinary Science, 45, 73-77.

  • تاریخ دریافت 10 مهر 1395
  • تاریخ بازنگری 07 خرداد 1396
  • تاریخ پذیرش 07 خرداد 1396